靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂的制备及其体外寻靶研究

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hujialian
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目的制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂,鉴定其理化特性并观察其体外寻靶能力。方法采用冷冻干燥超声法制备非靶向纳米超声微泡造影剂(N-N-Mb),通过生物素-亲和素桥连法,将生物素化的促黄体生成素释放激素(luteinzing hormone-releasing hormone,LHRH)与N-N-Mb连接,制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂(LHRH-NMb)。观察微泡镜下形态以及室温下保存时间。zeta检测仪检测粒径范围、表面电位,流式细胞术检测二抗分别与LHRHN-Mb、N-N-Mb结合率,光镜下观察LHRH-N-Mb与LHRH受体过表达的人卵巢癌OVCAR-3细胞结合情况。结果N-N-Mb、LHRH-N-Mb两种微泡成功制备,两者外观圆整,分布均匀,粒径大小分别为(372±45)、(511±64)nm,集中于360 nm与508 nm,两者粒径大小比较有统计学差异(P<0.05)。两种微泡电位分别为(-14.5±0.5)、(-14.6±0.8)mV。室温下保存16 d后,LHRH-N-Mb理化特性与刚制备时无统计学差异(P>0.05)。二抗与LHRH-N-Mb、N-N-Mb结合率分别为75.6%、0.83%,两者比较有统计学差异(P<0.05)。光镜下OVCAR-3细胞周围可见LHRH-N-Mb围绕或粘附,呈花环样结构,这种靶向结合能被生物素化的LHRH抗体预先阻断。结论通过冷冻干燥超声法和生物素-亲和素桥连法,可成功制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂,此微泡粒径小、稳定性高,且能体外靶向高效结合人卵巢癌OVCAR-3细胞。
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