3山东省农业科学院农业资源与环境研究所，山东济南250100）
　　摘要：采用不同方法对当年采集的新鲜无花果叶中芳香族成分进行萃取，并利用HPLC技术对无花果叶初提物、减压蒸馏及真空干燥提取物主要成分进行归一化分析，以补骨脂素得率为指标，探讨了不同抽提方法的优劣。正交试验表明，将无花果叶细碎20目，8倍乙醇索氏抽提，回流2次，每次提取2 h补骨脂素及乙醇抽提物得率较高。
　　关键词：补骨脂素；索氏抽提；真空干燥
　　中图分类号：S663.3文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）05-0100-03
　　无花果树为多年生落叶灌木，其特殊的芳香味不吸引虫害。现代医学研究发现，无花果叶提取物具有抗肿瘤、抗菌、降血糖、降血脂等多项药理作用[1，2]。无花果叶挥发油中主要含酯和醇类，主要成分是香豆素类，其中补骨脂素占很大比例。无花果叶与果实提取物中的天然补骨脂素、佛手柑内酯、苯甲醛已经被证明具有明显的抗癌活性，目前已作为抗肿瘤治疗辅助药物应用于临床[3]。
　　水蒸气蒸馏是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥发性的有机物质中（无花果叶精油具有一定挥发性）， 使该有机物质在低于100℃的温度下随水蒸气一起蒸馏出来， 再经进一步分离获得较纯物质。
　　有机溶剂提取法是用适宜的挥发性有机溶剂直接浸泡无花果叶，经渗透、溶解、分配、扩散等一系列物理过程，将精油从无花果叶中提取出来。用有机溶剂提取无花果叶精油可同时将低沸点和高沸点组分提取出来，从而减少芳香油成分的损失，所得精油的香气更接近天然无花果的香气，得率也更高。
　　本试验分别用水和乙醇对无花果叶进行初提，然后分别用乙酸乙酯进行减压蒸馏和用乙醇真空干燥进一步提取香气的有效成分，并借助高效液相色谱对不同提取方法下无花果叶中补骨脂素的含量进行了测定，最终确定了最佳提取工艺条件。
　　1试验材料、设备及主要工艺流程
　　11试验材料
　　以当年从常州日升生态农业有限公司无花果基地采集的新鲜无花果叶为试材。
　　12主要设备
　　实验室用提取罐、旋转真空浓缩器、高效液相色谱。
　　13工艺流程
　　新鲜无花果叶→清洗→剪切→杀青烘干→破碎→提取→浓缩。
　　2试验方法
　　将新鲜无花果叶清洗后剪切成2 cm宽的叶条，置于70～75℃烘箱干燥4 h，冷却后备用。
　　21无花果叶初提物提取
　　211水蒸气蒸馏提取1 kg无花果叶粉碎后水蒸气蒸馏，按100～200 kg/h 通入蒸气， 经蒸气夹带，精油与蒸气混合蒸出， 通过冷凝器冷凝变成油水混合液流出。馏出液温度不高于40℃，得200 g初提物。
　　212乙醇蒸馏提取200 g无花果叶粉碎后用95%乙醇1 600 ml回流提取2 h。
　　22初提物中芳香物质的再提取
　　221乙酸乙酯萃取将水蒸气蒸馏所得初提物继续用乙酸乙酯萃取，体积比（初提物 ∶乙酸乙酯）为2 ∶1。无水硫酸钠处理后，用减压蒸馏的方法进一步抽提，温度50～60℃。
　　222乙醇萃取将乙醇初提物每次加入1 L 95%乙醇，在80℃下蒸馏2 h，蒸2次。将抽提液采用旋转真空浓缩器真空浓缩，得到的粘稠状物质真空干燥8～12 h，浓缩温度、干燥温度均设定为45℃。
　　23芳香物质的化学成分分析
　　采用GC/MS对无花果叶芳香物质化学成分进行分析。
　　24不同方法提取的抽提物中补骨脂素的含量测定
　　采用高效液相色谱法的测定。具体步骤如下。
　　241标准样液制备配制补骨脂素标准溶液：补骨脂素200 mg溶解，转移至500 ml容量瓶中定容，得到04 mg/ml的补骨脂素标准样液。
　　242供试品溶液供试品溶液Ⅰ：水蒸气蒸馏得到的初提物；供试品溶液Ⅱ：乙酸乙酯减压蒸馏萃取得到的抽提物；供试品溶液Ⅲ：乙醇蒸馏萃取得到的抽提物。
　　243结果处理记录峰面积，以补骨脂素标准样液的浓度为横坐标，峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，求出每个供试品溶液中补骨脂素的浓度。