【摘 要】
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目的:通过体内外研究,从Hedgehog(Hh)信号通路探讨片仔癀(PZH)治疗大肠癌的作用机制。方法:以4种不同浓度(0、250、500、1 000μg/m L)的PZH干预体外培养的人大肠癌细胞株HT-
【机 构】
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福建中医药大学中西医结合研究院,福建省中西医结合老年性疾病重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81774121);福建省教育厅科技JK类项目(JK2013023);陈可冀中西医结合发展基金项目(CKJ2014016、CKJ2015002)
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目的:通过体内外研究,从Hedgehog(Hh)信号通路探讨片仔癀(PZH)治疗大肠癌的作用机制。方法:以4种不同浓度(0、250、500、1 000μg/m L)的PZH干预体外培养的人大肠癌细胞株HT-29,MTT实验检测细胞活力,集落形成实验观察细胞存活能力,RT-PCR检测PCNA、Bcl-XL、Bax、Survivin及Hh信号通路相关基因(Shh、Ptch、Smo、Gli1)的m RNA表达。在体构建HT-29小鼠皮下移植瘤模型及PZH(234 mg/kg·d-1)灌胃给药2周(5 d/周),第16天取材,测量移植瘤的重量,免疫组化检测移植瘤的Ki-67及Shh、Ptch、Smo、Gli1的蛋白表达。结果:PZH可显著减低HT-29细胞活力和存活能力,抑制小鼠皮下移植瘤的生长;RTPCR结果显示,PZH显著下调HT-29细胞增殖相关基因PCNA、凋亡抑制基因Bcl-XL、凋亡调控基因Survivin、Hh信号通路关键基因(Shh、Ptch、Smo、Gli1)的m RNA表达,上调促凋亡基因Bax的m RNA表达;免疫组化结果显示PZH可抑制移植瘤组织中增殖相关基因Ki-67、Hh信号通路关键基因(Shh、Ptch、Smo、Gli1)的蛋白表达。结论:片仔癀在体内外能通过调控Hedgehog信号通路抑制大肠癌细胞增殖,促进大肠癌细胞凋亡。
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