猪microRNA-378—1过表达载体构建及细胞水平验证

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:muzhe8835
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microRNA对细胞的增殖和分化有着重要的调节作用,从大白猪(Susscrofa)基因组DNA上扩增microRNA-378.1前体序列,经XhoI酶切后回收相应片段,连接到pEGP—miR载体中,构建重组载体pEGP.miR-378-1,转染猪胎儿成纤维细胞系(PEF),通过荧光观察转染效率及报告基因的表达效率,利用实时荧光定量PCR(QRT.PCR)测定细胞内microRNA.378—1的表达活性。结果表明,成功地构建了重组载体pEGP.miR-378-1;荧光观察转染后的细胞,显示有较高的转染效率
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