重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因工程菌的构建

来源 :临床检验杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suixin2002
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目的:构建稳定、高效表达重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的基因工程菌株,为临床检测心肌损伤及预后提供诊断试剂材料,促进cTnI诊断标准化的研究。方法:采用RT-PCR方法从人心肌组织总RNA中克隆出全长的人cTnI基因,将其插入到pMD19-T克隆载体中,经酶切和测序对目的基因分析,再插入到pET-21a(+)表达载体中,转化BL21(DE3),对诱导表达的目的蛋白行SDS-PAGE和采用锐普心梗仪检测重组蛋白的抗原性并准确定量。连续传代试验验证基因工程菌稳定性。结果:克隆了全长的cTnI基因,目的蛋白表
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