目的 探讨脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)抑制剂对胰岛β细胞遭受巨噬细胞介导的炎症损伤的保护作用.方法 采用Transwell小室构建小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7的共培养系统.在共培养前2h,在RAW264.7巨噬细胞中分别加入A-FABP的抑制剂(5μmol/L).共培养48 h后,用实时定量PCR和Western印迹法检测RAW264.7巨噬细胞上Toll样受体(TLR)4和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达,用ELISA方法检测细胞上清液中白细胞介素(IL-1)β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,此外,用含葡萄糖3、30 mmol/L的碳酸氢钠缓冲液(KRBB液)孵育MIN6胰岛细胞1h,用ELISA方法测定细胞上清液中胰岛素的浓度.结果 (1)共培养后,巨噬细胞上TLR4和A-FABP的表达水平以及细胞上清液中IL-1β和TNF-α的浓度均明显高于巨噬细胞对照组(均P ＜0.05)；(2)共培养后,高糖刺激的胰岛素分泌水平明显低于胰岛细胞对照组[(16.0±2.2)比(41.1±6.6)ng/ml,P＜0.05]；A-FABP的抑制剂干预后再共培养,巨噬细胞上TLR4和A-FABP的表达水平以及细胞上清液中的IL-1β和TNF-α的浓度均显著低于共培养对照组(均P＜0.05),高糖刺激胰岛β细胞的胰岛素分泌水平显著高于共培养对照组[(31.4±3.3)比(16.0±2.2)ng/ml,P＜0.05].结论 (1)巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,可活化炎症通路,释放炎症因子,损伤胰岛β细胞的胰岛素分泌能力；(2) A-FA BP的抑制剂可抑制巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,从而阻止胰岛β细胞胰岛素分泌能力的下降。
脂肪酸结合蛋白抑制剂在小鼠体外对胰岛β细胞遭受巨噬细胞介导的炎症损伤的保护作用
【摘 要】
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目的 探讨脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)抑制剂对胰岛β细胞遭受巨噬细胞介导的炎症损伤的保护作用.方法 采用Transwell小室构建小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7的共培养系统.在共培养前2h,在RAW264.7巨噬细胞中分别加入A-FABP的抑制剂(5μmol/L).共培养48 h后,用实时定量PCR和Western印迹法检测RAW264.7巨噬细胞上Toll样受体(
【机 构】
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410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科中南大学代谢内分泌研究所中南大学糖尿病中心中南大学代谢综合征研究中心糖尿病免疫学教育部重点实验室,410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科中南大学代谢内
【出 处】
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中华医学杂志
【发表日期】
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2012年92期
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