猪肌卫星细胞的分离培养及鉴定

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:templedb
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目的: 建立一种有效的猪肌卫星细胞分离、培养及鉴定体系.方法: 取仔猪3只, 从三角肌群处切取骨骼肌, 分别用链霉蛋白酶、胰酶及胶原酶消化组织.用差速贴壁法纯化肌卫星细胞, 并比较3种酶消化所获得的细胞数和细胞的存活率.最后采用Desmin免疫组化和MyoG和MyoD的RT-PCR鉴定肌卫星细胞.结果: 链霉蛋白酶消化所得肌卫星细胞数显著高于胰酶和I型胶原酶.3种酶消化所得细胞的存活率都较高, 无明显差异.Desmin免疫组化染色法的结果表明, 链霉蛋白酶消化所得肌卫星细胞中95%呈阳性反应.RT-PCR也检测到MyoG和MyoD的表达.结论: 链霉蛋白酶消化法是一种简便、高效分离猪肌卫星细胞的方法.
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