烟草渗调蛋白基因的分离克隆及序列分析

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参照国外报道的渗调蛋白基因序列,自行设计并合成了一对寡核苷酸引物,通过PCR技术从云南地方栽培的烤烟品种“红花大金元”基因组DNA中直接扩增出了其全编码序列。PCR产物纯化后直接克隆到pGEM-T载体系统中,转化大肠杆菌DH5α,在Xgal平板上筛选白色菌落,经SphI和SacI双酶切,鉴定所得的重组质粒中含有753bp左右的PCR扩增片段。采用双链双脱氧法定序分析表明所克隆的渗调蛋白基因编码区序列与国外迄今所报道的两个株系的序列完全一致,提示了该基因在进化上的保守性
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