具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV-NS3重组蛋白的纯化及活性分析

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yutou1888

【摘要】

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为深入探讨HCV-NS3蛋白的酶动力学性质,制备了具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV NS3重组蛋白.利用PCR扩增HCV非结构基因NS3,插入pPIC9,测序分析.携带NS3基因的重组质粒(pPIC9-NS3

【作者】

：

李体远徐宜英 Kevin Philips

【机构】

：

暨南大学医学院附二院深圳市人民医院临床医学研究中心,DepartmentofBiochemistry

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

：

2004年4期

【关键词】

：

丙型肝炎病毒非结构蛋白3 纯化酶活性重组蛋白 Hepatitis C virus (HCV) Non structure protein 3 Purifi

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为深入探讨HCV-NS3蛋白的酶动力学性质,制备了具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV NS3重组蛋白.利用PCR扩增HCV非结构基因NS3,插入pPIC9,测序分析.携带NS3基因的重组质粒(pPIC9-NS3)转化毕氏酵母菌菌株GS115,甲醇诱导表达NS3蛋白.重组蛋白首先采用Hitrap chelating柱进行亲和分离,之后使用Mono S HR柱进一步纯化.对纯化后的NS3重组蛋白的酶活性进行分析,结果表明,获得的重组蛋白分别具有蛋白酶及解旋酶活性.本研究为深入探讨NS3编码酶的功能和开发抗病毒药物

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