针刺对肥胖大鼠下丘脑神经肽Y基因表达的影响

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目的:观察针刺对肥胖大鼠下丘脑和血浆食欲刺激因子神经肽Y含量及下丘脑神经肽YmRNA表达的影响。方法:实验于2001-03/2002-08在南京中医药大学针灸实验室进行。①选用刚断乳SD雄性大鼠100只。将大鼠100只分2种饲料饲养:20只用普通饲料(实验鼠全价饲料,子卯牌,江苏省卫生厅药事干部培训中心、江浦实验动物饲料厂配制,江苏省药检所科协监制)喂养16周,另80只用自制高脂饲料(用改进后的高脂饲料,其配方质量分数为:普通饲料0.60,猪油0.12,蔗糖0.05,奶粉0.05,花生0.05,鸡蛋0.1,麻油0.01,食盐0.02)喂养16周。②选用以普通饲料喂养大鼠中的12只作为正常组;选用24只肥胖大鼠,按随机抽签法分为2组:模型组和针刺组,各12只。针刺组:针刺治疗前每日将所有大鼠放入自制的大鼠固定器中适应10min,连续3d。3d后,进行针刺治疗。取穴:后三里,内庭,用32号长1cm的美容针刺入约0.5cm,后三里用平补平泻法捻转运针1min,内庭用泻法捻转运针1min,然后接通G6805型电针治疗仪,采用频率为10Hz、强度为1.5V的连续波,以大鼠下肢出现轻微节律的抽搐为度。针刺每次10min,1次/d,两侧穴位交替使用。连续治疗14d。正常对照组和模型组大鼠每日同时放入固定器中适应10min,持续14d。③实验结束后,测定各组大鼠体质量、计算Lee’s指数[3√体质量g/体长(cm)×103];称量各组大鼠附睾、肾、心包周围脂肪及肝、肾质量;采用放射免疫法检测各组大鼠外周血和下丘脑神经肽Y含量;用反转录聚合酶链反应、RNA印迹试验测定下丘脑神经肽YmRNA表达水平。④组间比较用独立样本T检验,多组两两比较用方差分析。结果:根据实验需要,进入结果分析大鼠36只。①血浆神经肽Y:模型组和针刺组明显高于正常组(P<0.01,0.05),针刺组明显低于模型组(P<0.01)。②下丘脑神经肽Y,脑与血神经肽Y之比:模型组明显高于正常组(P<0.01),针刺组明显低于模型组(P<0.05,0.05)。③下丘脑神经肽Y基因表达:模型组显著高于正常组(1.45±0.57,0.40±0.10,P<0.01),针刺组明显低于模型组(0.35±0.12,P<0.01),针刺组与正常组相近(P>0.05)。④RNA印迹试验与反转录聚合酶链反应法测定的结果是一致的,下丘脑神经肽YmRNA表达:模型组明显高于正常组(P<0.01),针刺组明显低于模型组(P<0.05),针刺组与正常组差异不明显(P>0.05)。⑤体质量和Lee’s指数:模型组明显高于正常组(P<0.01),针刺组明显低于模型组(P<0.01)。⑥附睾周围、肾周、心包周围脂肪组织量、肝肾质量:肥胖组和针刺组明显高于正常组(P<0.05~0.01);针刺组明显低于模型组(P<0.05~0.01)。结论:针刺可显著降低肥胖大鼠体质量及外周血和中枢神经肽Y的含量,抑制下丘脑神经肽Y的基因表达,这可能是针灸减肥的重要作用机制之一。
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