靶向CGI-100基因shRNA干扰载体的构建与鉴定

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：WYH5198

【摘要】

：

目的：构建靶向CGI-100基因的RNAi表达载体并鉴定其抑制效率。方法：设计及化学合成3对靶向CGI-100基因的短发夹结构寡核苷酸，经退火成双链DNA片段，将其与经限制性内切酶BamHI和州n

【作者】

：

汪永强张彦雷燕

【机构】

：

重庆医科大学临床生化教研室重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室

【出处】

：

重庆医科大学学报

【发表日期】

：

2008年12期

【关键词】

：

CGI-100基因 RNA干扰 SHRNA K562细胞 CGI- 100 gene RNA interference shRNA K562 cel

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目的：构建靶向CGI-100基因的RNAi表达载体并鉴定其抑制效率。方法：设计及化学合成3对靶向CGI-100基因的短发夹结构寡核苷酸，经退火成双链DNA片段，将其与经限制性内切酶BamHI和州ndⅢ双酶切的PGenesil-1质粒连接，构建表达shRNA的重组质粒，用脂质体2000转染到K562细胞中进行表达，经RT-PCR和斑点杂交检测转染前后CGI-100基因表达的变化。结果：经DNA测序证实3对靶向CGI-100基因的RNA干扰表达载体PGenesil-1-CGI-100构建成功，其中第1对PGe

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