【摘 要】
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目的构建携带MYCT-1基因的重组慢病毒载体GV218-MYCT-1,并包装成慢病毒,为进一步研究及动物实验奠定基础。方法 MYCT-1基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定
【机 构】
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吉林大学第一临床医院,中国人民解放军第二〇二医院检验科
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目的构建携带MYCT-1基因的重组慢病毒载体GV218-MYCT-1,并包装成慢病毒,为进一步研究及动物实验奠定基础。方法 MYCT-1基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,获得GV218-MYCT-1重组慢病毒载体并转化细菌感受态细胞。克隆菌落行PCR鉴定,对阳性的重组质粒进行测序并转入293T细胞,荧光显微镜下观察GFP表达并行Western blot鉴定。将重组质粒与慢病毒包装系统一同转染293T细胞进行病毒包装,实时荧光定量PCR法检测病毒滴度。结果 DNA测序结果及Wes
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