【摘 要】
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目的 探讨五味子丙素(SchC)对过氧化氢(H2O2)诱导的人永生化角质形成细胞(HaCaT)衰老作用的影响及其可能机制.方法 体外培养HaCaT细胞,设置对照组、H2O2模型组、SchC处理组.
【机 构】
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北华大学医学技术学院,吉林省吉林市 132013;北华大学药学院,吉林省吉林市 132013;吉林医药学院检验学院,吉林省吉林市 132013
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目的 探讨五味子丙素(SchC)对过氧化氢(H2O2)诱导的人永生化角质形成细胞(HaCaT)衰老作用的影响及其可能机制.方法 体外培养HaCaT细胞,设置对照组、H2O2模型组、SchC处理组.采用CCK-8法检测细胞存活率;采用试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)水平;qRT-PCR检测基质金属蛋白酶、环氧合酶-2(COX-2)、凋亡相关基因mRNA的表达;Western blotting检测COX-2、基质金属蛋白酶、凋亡相关蛋白、衰老相关蛋白、转录因子NF-E2相关因子2(Nrf-2)、血红素加氧酶-1(HO-1)以及核因子-κB(NF-κB)、p-NF-κB的表达.结果 SchC浓度<100μmol/L时对HaCaT细胞的增殖活性无明显影响;H2O2浓度为800μmol/L时,细胞存活率降至对照组的(57.0±3.0)％(P<0.001).与H2O2模型组相比,加入SchC对细胞进行预保护,可增高细胞存活率以及SOD、GSH水平,降低MDA、ROS水平(P<0.05或P<0.01).Western blotting检测结果显示,SchC可下调P16、P21、p-NF-κB的表达(P<0.01),上调Nrf-2、HO-1的表达(P<0.05).qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,SchC可通过调控NF-κB通路上调caspase-3、caspase-9 mRNA和蛋白的表达,下调Bcl-2、基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-9)、炎性因子COX-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01).结论 SchC对H2O2诱导的HaCaT细胞氧化应激损伤衰老模型具有保护作用,可为五味子抗皮肤衰老产品的开发奠定基础.
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