中华按蚊谷胱甘肽-S-转移酶E6(AsGSTE6)的表达纯化与结晶

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【摘要】

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【目的】对中华按蚊Anopheles sinensis谷胱甘肽-S-转移酶E6（As GSTE6）进行初步晶体学研究,为深入研究其空间结构奠定基础。【方法】利用生物信息学软件,首先对中华按蚊As GSTE

【作者】

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苗娅张甜甜许柏英陈斌

【机构】

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重庆师范大学昆虫与分子生物学研究所,媒介昆虫重庆市重点实验室

【出处】

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昆虫学报

【发表日期】

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2018年1期

【关键词】

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中华按蚊谷胱甘肽-S-转移酶 AsGSTE6 原核表达纯化结晶

【基金项目】

：

重庆市基础与前沿研究计划项目(cstc2015jcyj BX0142,cstc2016jcyj A0375);重庆师范大学博士启动项目(15XLB009);国家自然科学基金项目(31672363,31372265);国家科技基础性工作专项重点项目(2015FY210300);广西科技重大专项(桂科AA17129002)

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【目的】对中华按蚊Anopheles sinensis谷胱甘肽-S-转移酶E6（As GSTE6）进行初步晶体学研究,为深入研究其空间结构奠定基础。【方法】利用生物信息学软件,首先对中华按蚊As GSTE6进行生物信息学预测和分析;然后进行分子克隆,构建重组子p ET28a-As GSTe6;利用大肠杆菌Escherichia coli原核表达系统进行诱导表达;采用Ni-NTA金属螯合层析和葡聚糖凝胶层析的方法对重组蛋白进行纯化;通过葡聚糖凝胶层析和化学交联的结果分析蛋白的聚合状态;运用坐滴蒸气扩散法对重

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