【摘 要】
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目的比较高渗造影剂(HOCM,泛影葡胺)和低渗造影剂(LOCM,欧乃派克)对人肾小管上皮细胞的毒性,探讨Bax／Bcl-2,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3在造影剂诱导肾小管上皮细胞凋
【机 构】
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目的比较高渗造影剂(HOCM,泛影葡胺)和低渗造影剂(LOCM,欧乃派克)对人肾小管上皮细胞的毒性,探讨Bax／Bcl-2,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3在造影剂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法以HKC细胞株为研究对象．实验分为7组:HOCM1组 (111 mgI／ml),HOCM2组(74 mgI／ml),LOCM1组(111 mgI／ml),LOCM2组(74 mgI／ml),甘露醇高渗对照组,甘露醇低渗对照组,培养基对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTY)试验和乳酸脱氢酶 (LDH)检测造影剂对体外培养HKC细胞的毒性作用。采用Hoechst染色、TUNEL染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、电镜和流式细胞仪DNA分析方法观察造影剂对HKC细胞凋亡的作用。采用 Western印迹方法检测Bax和Bcl-2蛋白含量的变化。采用荧光比色法检测caspase-3活性。结果 HOCM和LOCM组培养液中LDH水平较对照组显著增高(P<0．05),细胞活力较对照组显著降低(P<0．05),且与渗透浓度,作用时间及碘离子浓度有关。HOCM可诱导肾小管上皮细胞凋亡,且明显高于甘露醇高渗对照(P<0．05)。LOCM在本实验剂量不能诱导肾小管上皮细胞凋亡。HOCM在诱导HKC细胞凋亡时伴随有Bax、Bcl-2表达的上调,caspase-3活性升高。结论 HOCM和LOCM对肾小管上皮细胞均有毒性作用,LOCM的毒性作用明显小于HOCM。HOCM 可诱导人肾小管上皮细胞凋亡且与高渗及碘离子浓度有关。Bax／Bcl-2、caspase-3可能参与了造影剂诱导人肾小管上皮细胞凋亡的调控。
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