【摘 要】
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目的建立一个简便快速方法,用于诊断家族性载脂蛋白B-100缺陷症R3500w.方法设计一对寡核苷酸引物,其上游引物为突变引物.以PCB扩增目的DNA顺序,产物用限制酶Nco1酸解,酶解体
【机 构】
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暨南大学组织移植免疫中心,暨南大学医学院生化教研室
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目的建立一个简便快速方法,用于诊断家族性载脂蛋白B-100缺陷症R3500w.方法设计一对寡核苷酸引物,其上游引物为突变引物.以PCB扩增目的DNA顺序,产物用限制酶Nco1酸解,酶解体系中加入含Ncol切口的DNA片段作内参照物,以排除酶切时假阴性的出现.结果所设计引物能成功地用于PCR以扩增目的DNA片段,长144碱基对.产物与限制酶Ncol保温,正常基因产物不被切割,突变基因产物则由于引入一个人工限制酶切口而被切割,产生117碱基对的片段,这两长度不同的片段可被2%琼脂糖凝胶电泳所分离.利用这一方法
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