H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性

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【摘要】

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根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒（HPAIV）核蛋白（NP）基因序列设计引物，通过PCR扩增出A／Goose／HLJ／QFY／04（H5N1）毒株的NP基因片段，将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上，将

【作者】

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万春和刘明刘春国杨涛刘大飞齐金龙陈浩杜金铃李

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2008年5期

【关键词】

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禽流感病毒核蛋白基因昆虫细胞杆状病毒表达 avian influenza virus NP genes baculovirus insect cell sy

【基金项目】

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黑龙江省自然科学基金项目（ZJN0702-02）,国家“十一五”科技支撑计划项目（2006BAD06A05）

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根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒（HPAIV）核蛋白（NP）基因序列设计引物，通过PCR扩增出A／Goose／HLJ／QFY／04（H5N1）毒株的NP基因片段，将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上，将筛选的阳性重组转座载体pFastBacGP67B-NP转化至合有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞，经蓝白斑筛选和PCR鉴定，构建了杆状病毒表达载体，获得了重组转座子（rBacmid-NP），在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒（rBv

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