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目的构建真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI并检测其在内皮细胞中的表达,为冠状动脉旁路移植和经皮冠状动脉内成形术中转染血管内皮细胞抗凝治疗作了实验和理论的探索。方法用RT-PCR的方法提取人组织因子途径抑制因子(TFPI)基因,并引入Kozak序列,将(Kozak)TFPI亚克隆入pCMV质粒中。在阳离子脂质体介导下,转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测HUVEC中外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达。结果(Kozak)TFPI成功克隆入pC-M