H5亚型猪流感病毒HA1重组蛋白的制备及间接ELISA检测方法的建立

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiu_yue9
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利用化学合成技术合成H5亚型猪流感病毒(SIV)的HA1基因,克隆到原核表达载体pET-28a(+),构建了重组表达质粒pET28a—HA1/H5,用重组质粒转化表达菌株E.coli BL2l(DE3),经IPTG诱导表达,以镍螯合层析纯化表达蛋白;通过优化反应条件,建立了基于HA1重组蛋白的H5亚型SIV抗体间接ELISA(iHA1-ELISA)检测方法。SDS—PAGE分析结果显示,在大肠杆菌中成功表达了分子质量为45ku的His—HA1融合蛋白,表达蛋白以包涵体形式存在;Western—blot分析
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