【摘 要】
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为建立牛皮蝇蛆病的抗体检测方法,本研究从纹皮蝇Ⅰ期幼虫中提取总RNA,采用RT-PCR扩增了Hypodermin C（HC）基因。将该基因片段插入到原核表达载体pET-30a（＋）中进行原核表达。获得了
【机 构】
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内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古农业大学生命科学学院
【基金项目】
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教育部“春晖计划”合作项目（Z2007-1-01011、Z2007-1-01018）, 国家自然科学基金（30360082）
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为建立牛皮蝇蛆病的抗体检测方法,本研究从纹皮蝇Ⅰ期幼虫中提取总RNA,采用RT-PCR扩增了Hypodermin C（HC）基因。将该基因片段插入到原核表达载体pET-30a（＋）中进行原核表达。获得了31 ku以包涵体形式表达的重组HC蛋白。Western blot结果表明表达产物能够与阳性牛血清IgG特异性结合,具有良好的抗原活性。以纯化的重组HC作为包被抗原建立了牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法,实验确定抗原最佳包被浓度为15.63μg/mL,血清最佳稀释度为1∶80,阳性标准判定为待检血清OD值〉
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