DEC1基因shRNA慢病毒表达载体的构建及其稳转胶质瘤细胞系的建立

来源 :中华神经外科疾病研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxxxssss11112222
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目的 构建人分化型胚胎软骨发育基因1 (DEC1)的短发卡RNA (shRNA)慢病毒表达载体并建立稳定敲减DEC1表达的人脑胶质瘤细胞株T98G。方法 根据GenBank中DEC1基因cDNA序列设计合成两条特异性shRNA序列,同时设计1条非特异性序列作为阴性对照,分别克隆到PsiLVRU6MP质粒载体内,经酶切电泳、DNA测序鉴定后包装成慢病毒颗粒。再以3组慢病毒感染胶质瘤细胞系T98G,用嘌呤霉素筛选后,荧光显微镜下观察mCherry的表达,Western Blot检测各组DEC1蛋白的表达水平
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