【摘 要】
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目的:研究小干扰RNA抑制COL6A1基因表达对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:设计合成靶向COL6A1基因的siRNA,采用阳离子脂质体试剂瞬时转染膀胱癌细胞株T24,利用实时
【机 构】
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荆门市第一人民医院泌尿外科 湖北荆门,448000
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目的:研究小干扰RNA抑制COL6A1基因表达对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:设计合成靶向COL6A1基因的siRNA,采用阳离子脂质体试剂瞬时转染膀胱癌细胞株T24,利用实时荧光定量PCR和Western blot检测RNA干扰后COL6A1基因的沉默效果,评价siRNA设计的合理性及RNA干扰抑制COL6A1表达的有效性,分别在RNA干扰后第1、2、3天应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖状态,并绘制生长曲线,应用Transwell法检测各组膀胱癌侵袭能力.结果:靶向COL6A1的siRNA成功抑制了膀胱癌细胞株T24中COL6A1 mRNA及蛋白表达,COL6A1-siRNA组蛋白相对表达量为阴性对照组的14.1％,mRNA相对表达量为空白对照组的20.5％;MTT比色法显示COL6A1-siRNA组细胞增殖能力显著减弱(P＜0.05),在第1、2、3天后重复检测,分别达到了空白对照组的75.6％、58.2％和49.4％;Transwell细胞迁移实验显示COL6A1-siRNA组细胞迁移能力明显减弱(P＜0.05),穿膜细胞数为空白对照组的45.3％.结论:利用siRNA技术能有效降低COL6A1基因的表达,同时有效抑制T24细胞的体外增殖和侵袭的能力.
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