体外人脐带间充质干细胞通过促分泌前列腺素E2肝细胞生长因子吲哚胺2,3-双加氧酶抑制干燥综合征CD4+ T细胞的活化增殖

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目的

探讨体外人脐带MSCs促分泌的前列腺素E2(PGE2)、肝细胞生长因子(HGF)以及吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在pSS中对外周血活化CD4+ T细胞的抑制作用。

方法

原代分离脐带MSCs,并经流式细胞术鉴定。荧光激活细胞分选术(FACS)分选pSS患者外周血CD4+ T细胞,分为3组:分别为活化CD4+ T细胞组(CD3、CD28抗体共刺激72 h)、MSCs共培养组(活化CD4+ T细胞与MSCs共培养72 h)和IFN-γ预刺激后MSCs共培养组(活化CD4+ T细胞与IFN-γ预刺激后的MSCs共培养72 h),活化CD4+ T细胞组为对照。共培养72 h后,收集悬浮的CD4+ T细胞,进行细胞计数,ELISA法检测共培养上清中细胞因子PGE2、HGF和IDO的表达水平。组间均数比较用单因素方差分析,多重比较采用LSD法。

结果

pSS患者活化CD4+ T细胞组、MSCs共培养组和IFN-γ预刺激后MSCs共培养组的培养上清中PGE2浓度[分别为(111±4)pg/ml、(2 814±6)pg/ml和(2 716±8)pg/ml,F=167 292.12,P<0.01];HGF浓度[分别为(597±9)pg/ml、(383±9)pg/ml和(727±12)pg/ml,F=878.61,P<0.01];IDO浓度[分别为(143±4)pg/ml、(835±5)pg/ml和(588±3)pg/ml,F=21 104.41,P<0.01]。相对于活化CD4+ T细胞组,MSCs共培养组及IFN-γ预刺激后MSCs共培养组的培养上清中PGE2浓度升高(t=509.88,P<0.01;t=491.48,P<0.01),IDO浓度也升高(t=202.69,P<0.01;t=130.39,P<0.01),同时活化的CD4+ T细胞增殖受到抑制(t=-16.20,P<0.01;t=-31.48,P<0.01);相对于MSCs共培养组,IFN-γ预刺激后MSCs共培养组的培养上清中PGE2、IDO浓度均有降低(t=-18.40,P<0.01;t=-72.30,P<0.01),而HGF浓度升高(t=41.51,P<0.01),同时活化的CD4+ T细胞增殖受到进一步抑制(t=-15.28,P<0.01)。

结论

MSCs在体外可以抑制pSS活化的CD4+ T细胞增殖,其对CD4+ T细胞的抑制作用可能通过促分泌PGE2、HGF、IDO等可溶性因子来实现,推测在IFN-γ刺激下活化的MSCs更多地通过促分泌HGF增强其抑制作用,而过多的PGE2、IDO可能对MSCs产生反馈抑制调节。

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