利用酵母双杂交系统筛选Pak4相互作用蛋白质

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：asgtzyj_lxj

【摘要】

：

目的利用酵母双杂交系统从人胎脑eDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白。方法将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。质粒转化到酵母感受态AH109和Y

【作者】

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李彦姝李晓东吴怡李丹妮李丰

【机构】

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中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室,沈阳医学院病原生物学教研室,中国医科大学94期临床医学系

【出处】

：

中国医科大学学报

【发表日期】

：

2009年1期

【关键词】

：

Pak4 酵母双杂交信号转导 p21-activated kinase 4 yeast two- hybrid signal tmnsduction

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目的利用酵母双杂交系统从人胎脑eDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白。方法将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。质粒转化到酵母感受态AH109和Y187中验证蛋白表达。将人胎脑eDNA文库转化酵母Y187，与已转化诱饵质粒的AHl09酵母进行交配实验。交配子在SD／-Leu／-Trp／-His和SD／-Leu／-Trp／-His／-Ade／X—α—gal平板上筛选，阳性克隆质粒酶切鉴定。结果成功构建了pGBKT7-Pak4 KD诱饵质粒，Westernblot证实其在

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