利用光遗传学技术实现光起搏的实验研究

来源 :中国心脏起搏与心电生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lucky525
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目的利用光遗传学技术是否能有效实施光照夺获心脏,实现心脏光起搏,探讨光照强度对心脏夺获率的影响。方法取15只C57雌性小鼠,随机分成3组:正常组6只,空载病毒组6只,ChR2组3只(A、B、C小鼠),经颈静脉给三组小鼠分别注射100μl生理盐水,100μl pAOV-CAG-mcherry,100μl pAOV-CAG-hChR2(H134R)-mcherry。8周后,进行离体心脏Langendorff离体灌流,并给予473nm的蓝光光照刺激,观察小鼠的心律是否能被光刺激夺获,并比较不同功率下的光刺激对心脏夺获率的影响,观察光刺激和电刺激产生的单相动作电位(MAP)之间是否存在差异。结果ChR2组小鼠的心脏节律能被光照夺获,一定范围内夺获率与功率成正相关关系,且17.3mW的光照基本能满足光照夺获心律所需功率的大小,正常组和空载病毒组小鼠心脏的节律均不能被光照夺获。ChR2组A、B、C 3只小鼠光照夺获心律所需的功率大小差别较大,B小鼠心脏更容易被光夺获,可能与心脏ChR2表达量有关。光刺激与电刺激产生的MAP存在差异,光刺激产生的MAP的达峰时间比电刺激短,且动作电位的复极时程达10%,30%,50%,70%的值小于电刺激。结论利用光遗传学技术实现心脏光起搏技术可行。光敏蛋白ChR2成功表达在靶器官上是光遗传学关键的一步,光刺激心脏的夺获率不仅与光照功率的大小有关,可能还与心脏表达ChR2的量相关。
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