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采用辛酸-硫酸铵法提取兔抗牛病毒性腹泻-黏膜病毒（BVDV）高免血清中的免疫球蛋白IgG，辣根过氧化物酶标记提纯后IgG，建立了检测BVDV抗原的双抗体夹心斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA）法。结果显示，抗体最佳包被量为300μg／mL，酶标记抗体的最适浓度为1：50倍稀释，以5％牛血清作为封闭液、封闭45min效果最佳，抗原最小检出量是1．34μg/mL。应用建立的检测方法对河北省内78份腹泻奶牛血样进行了检测，阳性检出率为57．69％；经卡方检验分析，建立的Dot—ELISA与琼脂扩散（AGP