【摘 要】
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目的对模拟人卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单链抗体6B11scFv进行人源化改造和表达.方法采用重叠PCR和基因工程技术,将6B11scFv基因与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合,构建
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目的对模拟人卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单链抗体6B11scFv进行人源化改造和表达.方法采用重叠PCR和基因工程技术,将6B11scFv基因与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合,构建人源化抗独特型抗体6B11VHVLhC基因.用IPTG诱导大肠杆菌进行表达,并采用酶切法、DNA测序、SDS-PAGE电泳、ELISA和免疫印迹技术等进行鉴定.结果酶切和DNA测序表明插入片段正确;SDS-PAGE凝胶电泳显示融合蛋白分子量50 000 Da处有一诱导蛋白带;而不连续非变性凝胶电泳表达产物分子量为1000
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