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目的 :在大肠杆菌中克隆和表达NADPH依赖的乙酰乙酰辅酶A还原酶基因。方法 :通过PCR方法克隆来源于Alcali geneseutrophus菌的NADPH依赖性的乙酰乙酰辅酶A还原酶基因phbB ,将其克隆在大肠杆菌表达质粒pET2 8a中 ,进行PCR和DNA序列测定验证 ,并通过IPTG诱导表达。结果 :通过PCR和DNA核酸序列分析 ,证实获得的基因片段为phbB全编码序列 ,phbB被克隆在大肠杆菌表达质粒pET2 8a中 ,重组表达质粒在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中经IPTG诱导获得表达。结论 :获得了Al caligeneseutrophus菌的NADPH依赖的乙酰乙酰辅酶A还原酶基因 ,将其克隆在pET2 8a中 ,经诱导获得PhbB的表达 ,为进一步研究PhbB的理化性质和酶动力学性质奠定了坚实的基础