观察转移抑制基因nm23-H1对肺癌细胞株L9981中Wnt信号传导通路中糖原合成激酶-3β(GSK-3β)的表达量和活性的影响。
方法将稳定转染nm23-H1基因的肺癌细胞株、原代细胞株L9981和空载体转染细胞株培养传代，分别设为nm23-H1转染组、对照组和空白转染组。应用Western blot分别检测应用20 mmol/L LiCl处理前后3组肺癌细胞株胞质、胞核中GSK-3β的表达水平，测定上述肺癌细胞株胞质和胞核中的GSK-3β活性。
结果(1) nm23-H1转染组胞质和胞核中GSK-3β蛋白表达量分别为(6 639±503)和(4 481±446) A，空白转染组分别为(645±352)和(726±68) A，对照组分别为(763±267)和(683±49) A。3组细胞株间胞质和胞核中GSK-3β表达量差异有统计学意义(P＝0.025)。两两比较：nm23-H1转染组胞质和胞核GSK-3β表达水平均显著高于空白转染组和对照组(P＝0.017)，而后两者之间比较均差异无统计学意义(P＝0.094)。(2)nm23-H1转染组胞质和胞核GSK-3β激酶活性分别为(29 371±2 492)和(9 647±859)每分钟脉冲数，空白转染组分别为(11 241±1 495)和(1 492±176)每分钟脉冲数，对照组分别为(14 271±1 137)和(1 853±113)每分钟脉冲数。3组细胞株间胞质和胞核中GSK-3β酶活性差异有统计学意义(P＝0.032)，两两比较：nm23-H1转染组，胞质和胞核GSK-3β酶活性均显著高于空白转染组和对照组(P＝0.027)，而后两者之间比较均差异无统计学意义(P＝0.131)。(3)经20 mmol/L LiCl处理后，nm23-H1转染组胞质和胞核中GK-3β表达量分别为(5 037±427)和(823±350) A，与处理前比较均差异无统计学意义(P＝0.168)，空白转染组细胞株经LiCl处理后胞质和胞核中GSK-3β表达量分别为(2 174±126)和(248±12) A，对照组则分别为(2 273±128)和(253±14) A，两个细胞株胞质和胞核中GSK-3β表达量均显著低于处理前(P＝0.012、0.015)。(4)经LiCl处理后，nm23-H1转染组胞质和胞核GSK-3β激酶活性分别为(12 837±1 042)和(748±215)每分钟脉冲数，空白转染组分别为(4 739±401)和(947±126)每分钟脉冲数，对照组分别为(4 638±401)和(1 162±127)每分钟脉冲数，3组细胞株胞质和胞核GSK-3β激酶活性均显著低于处理前(P＝0.006、0.029、0.010)。
结论nm23-H1基因转染能显著上调人肺癌细胞L9981中GSK-3β的蛋白表达和活性。其可能通过上调人肺癌细胞中GSK-3β的蛋白表达和活性抑制Wnt信号传导而发挥作用。