【摘 要】
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为探究棕榈酸诱导 BRL 3A细胞脂肪变性的机制,以不同浓度的 PA(0、0.2 、0.4 、0.6 mmol · L-1)处理BRL 3A细胞 24 h.用 CCK-8 法、RTCA技术检测细胞增殖情况;油红 0染色,观
【机 构】
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扬州大学兽医学院,扬州 225009江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州225009;扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,扬州225009;
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为探究棕榈酸诱导 BRL 3A细胞脂肪变性的机制,以不同浓度的 PA(0、0.2 、0.4 、0.6 mmol · L-1)处理BRL 3A细胞 24 h.用 CCK-8 法、RTCA技术检测细胞增殖情况;油红 0染色,观察细胞脂滴生成情况;DAPI/F-ac-tin双染,观察细胞核及骨架形态;采用比色法测定 TG含量;采用 RT-PCR检测脂肪合成相关基因 Acaca,Fasn 、Dgat2转录水平;采用 Western blot检测脂肪合成关键蛋白 ACC 、FAS、SCD1、GPAM、DGAT2表达量.结果显示:与对照组相比.0.2 、0.4 mmol· L-1 PA对细胞增殖无影响,0.6 mmol·L-1 PA抑制细胞增殖;油红 0染色结果显示 0.4 mmol· L-1 PA处理细胞 24 h,脂滴大量蓄积,发生明显脂肪变性;随 PA浓度升高,细胞核发生皱缩、变形、碎裂,细胞骨架被破坏,微丝断裂;TG含量极显著增加(P＜0.01);不同浓度 PA(0.2 、0.4 、0.6 mmol ·L-1)处理组脂肪合成关键基因 Acaca 、Fasn 、Dgat2 mRNA转录水平均显著升高(P＜0.05),ACC 、FAS、SCDl、GPAM 、DGAT2蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);0.6 mmol · L-1 PA组与 0.4 mmol· L-1 PA组相比,SCD1蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).离浓度棕榈酸抑制 BRL 3A细胞增殖,对细胞核及骨架产生损伤;棕榈酸诱导细胞发生脂滴蓄积.TG增加,通过上调脂肪合成关键基因 Acaca,Fasn 、Dgat2 mRNA转录水平及 ACC/FAS/DGA T2通路蛋白表达水平诱导细胞发生脂肪变性.
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