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目的建立测定方法,检测反相脂质纳米粒（RLBN）对人工肠液中拓扑替康的保护作用。方法二步冻干-复溶法制备拓扑替康反相脂质纳米粒（RLBN-TPT）油溶液。建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定拓扑替康两种构型的含量。考察RLBN-TPT在模拟肠液中的释放曲线,研究拓扑替康的稳定性。结果用优化的HPLC条件测定拓扑替康的内酯与开环形式,二者分离度符合要求,线性范围为0.25~5μg/ml。与拓扑替康水溶液比较,RLBN-TPT中的拓扑替康在肠液中的稳定性明显增强,开环构型产生的速率明显减小（P〈0.05）。