恶性疟原虫Fcc-1/HN株MSP1_(19)基因的体外扩增及鉴定

来源 :中国寄生虫病防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blue1234sky
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本文根据恶性疟原虫MSP119已知序列,自行设计一对用于特异扩增MSP1C端19肽基因的引物P1、P2,在P1引物中引入SalⅠ酶切位点及ATG起始密码子,在P2引物中引入XbaⅠ酶切位点及终止密码子,经PCR扩增获得363bp大小片段,与预期大小相符。采用“压碎与浸泡法”纯化回收PCR产物,PCR产物经套式PCR及酶切鉴定证实与预期大小相符,说明所获确为MSP119基因。为进一步将该基因与PfCMR基因进行重组表达复合抗原和免疫接种奠定基础。 Based on the known sequence of Plasmodium falciparum MSP119, we designed a pair of primers P1 and P2 for specific amplification of the MSP1 C-terminal 19 peptide gene, introduced Sal Ⅰ restriction site and ATG start codon into P1 primer, Introduced Xba Ⅰ restriction sites and stop codons, amplified by PCR 363bp size fragment, in line with the expected size. The PCR products were purified by crushing and soaking method. The PCR products were verified by nested PCR and restriction enzyme digestion, which was consistent with the expected size, indicating that the MSP119 gene was obtained. It laid the foundation for the further recombination of this gene and PfCMR gene for the recombinant antigen and immunization.
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