【摘 要】
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目的:构建ShRNA沉默SLC7A11基因,并转染喉癌细胞株,为研究SLC7A11基因在喉鳞状细胞中作用提供基础。方法:针对SLC7A11基因构建3个表达特异性的ShRNA的真核表达载体,通过与包
【机 构】
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承德医学院第二附属医院耳鼻喉科,首都医科大学附属北京同仁医院
【基金项目】
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国家自然科学基金,(编号:81502493)
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目的:构建ShRNA沉默SLC7A11基因,并转染喉癌细胞株,为研究SLC7A11基因在喉鳞状细胞中作用提供基础。方法:针对SLC7A11基因构建3个表达特异性的ShRNA的真核表达载体,通过与包装质粒共转染293T细胞包装慢病毒。将病毒感染喉癌UMCC-5和Hep-2细胞,48h后加入puromycin抗生素进行筛选细胞3代以上,使用荧光显微镜观察筛选后的稳定表达对应shRNA细胞,直至无抗性细胞全部去除。通过RT-PCR及Westernblot的方法比较实验组及空白对照的各组细胞SLC7A11基因mR
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