【摘 要】
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根据已经发表的Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因序列,设计1对特异性引物（上下游分别插入Bam H I和Sac I酶切位点）,利用PCR技术扩增出VP1基因,经Bam H I和Sac I双酶切后,将其克隆至原核表
【机 构】
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江苏农牧科技职业学院,扬州大学兽医学院
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根据已经发表的Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因序列,设计1对特异性引物（上下游分别插入Bam H I和Sac I酶切位点）,利用PCR技术扩增出VP1基因,经Bam H I和Sac I双酶切后,将其克隆至原核表达载体p ET-32a上,获得重组表达质粒p ET-VP1。重组质粒转化感受态细胞E.coli BL21（DE3）,重组蛋白经IPTG诱导成功表达。将重组蛋白切胶免疫6周龄的BALB/c小鼠,3次免疫后采血,制备DHV-Ⅰ的多克隆抗体。SDS-PAGE结果显示,成功表达出的重组蛋白分子量约为46 000。W
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