用慢病毒载体介导的RNAi感染CB3细胞后抑制FLI-1的表达

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wapp592
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目的观察慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)方法对小鼠红白血病细胞(CB3)中FLI-1基因表达的抑制作用。方法设计制备针对目的基因FLI-1的小干扰RNA(siRNA),构建制备目的基因的siRNA慢病毒载体,PCR阳性菌落进行测序鉴定,对慢病毒包装与滴度测定后感染CB3细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况。RT-PCR和Westernblot检测病毒感染CB3细胞后FLI-1的表达。结果成功构建了针对FLI-1基因的siRNA慢病毒载体,并包装成慢病毒颗粒,病毒滴度为1.5E+9TU/mL,并可
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