【摘 要】
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目的 基于中医方证相关理论,采用iTRAQ技术筛选衰老进程中虚证相关差异蛋白变化,以金匮肾气丸干预衰老小鼠,以方测证模式探寻阳虚证的物质基础.方法 选用30只自然衰老雄性小
【机 构】
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黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学附属第一医院,黑龙江哈尔滨150040
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目的 基于中医方证相关理论,采用iTRAQ技术筛选衰老进程中虚证相关差异蛋白变化,以金匮肾气丸干预衰老小鼠,以方测证模式探寻阳虚证的物质基础.方法 选用30只自然衰老雄性小鼠为研究对象,3月龄小鼠10只为青年组,剩余小鼠饲养至20月龄后随机分为老龄组和金匮肾气丸组,每组各10只.金匮肾气丸组灌胃给药剂量为10.53 g/kg,其余两组给予等量生理盐水.摘取小鼠肝脏组织,以蛋白滤膜辅助酶解方法进行酶解,之后iTRAQ标记,采用Easy nLC1000和orbitrap Elite液质联用平台对iTRAQ标记样品进行数据采集,经数据库UniProt release 2016_07筛选,使用Significant B 算法利用余补误差函数,以Foldchange ＞ 1.2或＜0.83,且P＜0.05进行差异蛋白的筛选,鉴定出的差异蛋白进行生物信息学分析.结果 青年组与老龄组共鉴定出995个差异蛋白;老龄组与金匮肾气丸组共鉴定出674个差异蛋白,发现79个差异蛋白在金匮肾气丸给药后回调.结论 金匮肾气丸回调的差异蛋白主要富集在破骨细胞分化、癌症中心碳代谢、氨酰-tRNA生物合成、补体途径和花生四烯酸代谢通路中.
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