抗弓形虫噬菌体单链抗体库的构建及筛选

来源 :湖北大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:snowl
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采用弓形虫可溶性抗原攻击的小鼠,取小鼠脾脏从中提取细胞总RNA,通过RTPCR扩增鼠源抗体VH和VL基因,并采用重叠PCR(SOE-PCR)方法构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载体pCANTAB5E中,转化于感受态大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.从20个噬菌体克隆中筛选到15个具有弓形虫可溶性抗原结合活性的阳性克隆.研究提示成功地构建出了一个有效库容量为2.2×10^6的鼠抗弓形虫噬菌体单链抗体库.
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