重组人细胞红蛋白的表达纯化及谱学表征

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以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白,并比较了其谱学特征和热稳定性.可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀,再依次经Hiprep16/10QFF阴离子交换柱、Hiload16/60 Superdex75凝胶过滤柱和CM Sepharose FF阳离子交换柱纯化,得到电泳纯的包涵体蛋白;包涵体蛋白经盐酸胍变性溶解、外加血红素重组和柱层析得到了电泳纯的可溶性蛋白.电喷雾质谱表明,以这两种形式得到的蛋白分子量相差153.0,紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱均表明,这两种形式的蛋白在血红素构象上存在
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