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目的 评价抑制Notch信号通路后人牙髓细胞在细胞、代谢酶、基因3个水平的老化指标变化,探讨Notch信号通路对人牙髓细胞老化的作用.方法 采用γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯抑制Notch信号通路后(抑制组)观察细胞形态,以正常培养基中添加抑制剂的溶剂二甲基亚砜为阴性对照组,检测两组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、细胞老化相关β-半乳糖苷酶以及老化相关基因p53的表达.结果 抑制Notch信号通路后人牙髓细胞从第10代开始出现细胞形态老化的表现.抑制组自第8代即出现ALP阳性细胞减少,ALP活性下降为(35.36±2.55) U/g,显著低于阴性对照组[(49.76±4.30) U/g](t=4.989,P=0.008).抑制组第8代细胞即开始出现老化相关β-半乳糖苷酶阳性染色,第10代时出现大量阳性染色细胞.第10代时,抑制组细胞p53基因相对表达量(1.7±0.4)显著高于阴性对照组(设为1.0)(t=3.581,P=0.012).结论 抑制Notch信号通路后,人牙髓细胞在细胞、代谢酶、基因3个水平均出现老化前移表现,提示Notch信号通路可以影响人牙髓细胞的生命周期。