【摘 要】
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目的通过分离和培养BALB/C小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),制备用于大鼠精原干细胞(SSCs)培养的饲养层。方法从胎龄为12.5~14.5 d的胎鼠中分离MEF,经不同浓度(5、10、15 mg/L)丝裂
【机 构】
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兰州大学第二医院泌尿外科,兰州军区兰州总医院泌尿外科
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目的通过分离和培养BALB/C小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),制备用于大鼠精原干细胞(SSCs)培养的饲养层。方法从胎龄为12.5~14.5 d的胎鼠中分离MEF,经不同浓度(5、10、15 mg/L)丝裂霉素C处理不同时间(1.5、3、4.5 h),应用噻唑蓝(MTT)法测定其增殖活性。将大鼠SSCs接种到最佳饲养层上培养,观察细胞生长情况。结果从胎龄为12.5~14.5 d的胎鼠中分离培养的MEF数量多,增殖快。常温下,经0.25%胰酶(含0.04%EDTA)处理2~3 min细胞增殖状况良好。经10 mg/L丝裂霉素C处理3 h MEF增殖不明显,与0 d比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 12.5~14.5 d是分离培养小鼠MEF的最佳胎龄,10 mg/L丝裂霉素C作用3 h对MEF的增殖具有良好的抑制作用,有利于大鼠SSCs的培养。
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