西瓜果皮底色基因ClCGmenG的精细定位

来源 :中国瓜菜 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lan737898
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  目的与意义:西瓜是一种在世界范围内广泛种植的园艺作物,果皮顏色是西瓜重要的农艺性状。西瓜果皮颜色具有绿色(浅绿色到墨绿色)、黄色、灰白色等。西瓜果皮颜色是一种质量性状,但是其遗传规律和形成机制是有争议的。尽管文献中已报道多种关于西瓜皮色的遗传模型,但关于西瓜皮色的基因定位研究较少。通过2年的试验研究,西瓜果皮颜色(墨绿色和浅绿色)是由1个位于8号染色体末端的基因控制的,墨绿色对浅绿色是显性。本研究基于课题组遗传图谱关于果皮颜色的初定位结果,结合西瓜参考基因组(97103和Charleston Gray)的序列信息,旨在通过精细定位确定控制西瓜果皮颜色的候选基因,为西瓜分子遗传育种提供理论依据。
  材料与方法:亲本材料为具有墨绿色果皮的‘9904’、浅绿色果皮的‘Handel’。通过亲本杂交后自交得到F2分离群体,通过F1与亲本分别杂交得到BC1P1、BC1P2回交群体。F2群体分别种植于2017冬季和2018春季,各432株、560株。BC1P1(140株)和BC1P2(161株)种植于2018年秋季。通过使用CAPS和SNP分子标记在F2分离群体进行重组单株筛选,进行精细定位,并结合序列分析、表达测定等确定候选基因。
  结果与分析:(1)在F2分离群体中进行重组单株筛选,最终将候选基因定位在CAPS29869645和SNP29901009两个标记大约31.4 kb的范围内,共有5个重组单株,(2)将精细定位确定的31.4 kb候选区间在西瓜参考基因组‘Charleston Gray’上进行比对分析,发现在此区间内只有4个候选基因(ClCG08G017800、ClCG08G017810、ClCG08G017820、ClCG08G017830),将上述4个基因在亲本中进行扩增、测序,发现在ClCG08G017810基因中CDS区域存在一个非同义SNP突变(C→G),造成了编码多肽链的第171位氨基酸残基从精氨酸(R)到甘氨酸(G)的变化。ClCG08G017810根据基因注释,其编码2-phytyl-1,4-bete-naphthoquinone methyltransferase,该酶涉及叶绿醌的生物合成。初步推断该基因为控制西瓜果皮颜色的候选基因。(3)通过ClCG08G017810的表达分析可知,相对于浅绿色果皮亲本‘Handel’,该基因在墨绿色果皮亲本‘9904’中具有较高的表达量。
  结
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