【摘 要】
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目的 基于ERK1/p38MAPK通路观察杞参方对高渗诱导的角膜上皮细胞(HCECs)的保护作用.方法 通过500 mOsm/L浓度渗透压作用于HCECs制造干眼细胞模型,将空白血清、玻璃酸钠滴眼液、杞参方颗粒高、中、低剂量含药血清作用于干眼模型HCECs.采用CCK-8法检测HCECs的存活率,ELISA法检测细胞外液炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-8的表达,ICC法检测凋亡因子caspase-3的蛋白表达,Western blotting法检测HCECs的ERK1、p38MAPK及磷酸化蛋
【机 构】
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辽宁中医药大学研究生学院,沈阳 110032;辽宁中医药大学附属第二医院眼科,沈阳 110034;辽宁中医药大学研究生学院,沈阳 110032;辽宁中医药大学附属第二医院眼科,沈阳 110034;沈阳
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目的 基于ERK1/p38MAPK通路观察杞参方对高渗诱导的角膜上皮细胞(HCECs)的保护作用.方法 通过500 mOsm/L浓度渗透压作用于HCECs制造干眼细胞模型,将空白血清、玻璃酸钠滴眼液、杞参方颗粒高、中、低剂量含药血清作用于干眼模型HCECs.采用CCK-8法检测HCECs的存活率,ELISA法检测细胞外液炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-8的表达,ICC法检测凋亡因子caspase-3的蛋白表达,Western blotting法检测HCECs的ERK1、p38MAPK及磷酸化蛋白表达情况.结果 与空白组相比,各组HCECs存活率均显著降低(P<0.01),各组细胞外液炎性细胞因子IL-1β、IL-8及HCECs中caspase-3、p-ERK1、p-p38MAPK蛋白表达水平显著增高(P<0.01);与模型组相比,各用药组HCECs存活率显著增加(P<0.01),各用药组IL-1β和IL-8、西药组和杞参方高、中剂量组caspase-3和p-ERK1及杞参方高、中剂量组p-p38MAPK蛋白表达减少(P<0.05);与西药组相比,杞参方高剂量组HCECs存活率显著增加(P<0.01),杞参方高剂量组的IL-1β、IL-8、caspase-3、p-ERK1、p-p38MAPK与杞参方中剂量组的IL-1β、p-ERK1、p-p38MAPK及杞参方低剂量组的IL-8蛋白表达减少(P<0.05).结论 杞参方颗粒可降低高渗诱导HCECs的ERK1、p38MAPK的磷酸化蛋白表达,降低细胞外液炎性细胞因子IL-1β、IL-8和HCECs凋亡因子caspase-3的表达,最终有效抑制炎症反应和细胞凋亡.
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