【摘 要】
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甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质,在植物体内是以胆碱为底物,经两步氧化而合成的.菠菜中,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶(Choline Monooxygenase,CMO).为了研究胆
【机 构】
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北京林业大学生物科学与技术学院加拿大林务局大西洋林业中心;
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甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质,在植物体内是以胆碱为底物,经两步氧化而合成的.菠菜中,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶(Choline Monooxygenase,CMO).为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力,在300 mmol/L高盐浓度(n(NaCl):n(CaCl2)=5.7:1)的条件下,作者分离纯化了菠菜mRNA,经RT-PCR得到全长(1.3kb)胆碱单氧化酶(CMO)cDNA,与已经报道的基因序列相比较,同源性为99%.根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列.将PCR纯化产物与pET-30a+连接,构建了重组表达载体pETCMO,并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达.
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