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应用RT—PCR获得新城疫病毒（NDV）LaSota株的血凝素神经氨酸酶（HN）基因片段，将HN基因片段定向插入毕赤酵母表达载体pPICZaA，构建了分泌型表达载体pPICZaAHN，将其用SacI线性化后电转化入P．pastorisX-33。经高抗性及阳性转化子筛选得到重组菌株X-33／pPICZaA—HN，甲醇诱导后，表达产物的上清液经SDS—PAGE、Western—blot和血凝活性检测，结果约在97ku处有目的条带，比预期分子质量大．占总蛋白的53％，与NDV阳性血清发生特异性免疫反应，并具有较