【摘 要】
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目的利用新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）反向遗传系统构建表达呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）F蛋白的重组病毒,并以BALB/c小鼠为动物模型,评价其免疫原性。方法在已建立的NDV反向遗传系统的基础上,将RSV F基因插入NDV全长cDNA克隆中,构建并拯救获得表达RSV F蛋白的重组病毒r LS/RSV-F。采用间
【机 构】
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北京市疾病预防控制中心北京市预防医学研究中心免疫预防所
【基金项目】
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北京市属医学科研院所公益发展改革试点项目（京医研2018-1）； 北京市疾病预防控制中心、北京市预防医学研究中心科研培育专项（2017-BJYJ-13）；
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目的利用新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）反向遗传系统构建表达呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）F蛋白的重组病毒,并以BALB/c小鼠为动物模型,评价其免疫原性。方法在已建立的NDV反向遗传系统的基础上,将RSV F基因插入NDV全长cDNA克隆中,构建并拯救获得表达RSV F蛋白的重组病毒r LS/RSV-F。采用间接免疫荧光（indirect immunoinfluscent assay,IFA）法鉴定RSV F蛋白的表达;以HA、病毒半数鸡胚感染量（50%infective dose,EID50）、半数组织感染量（50%tissue infectious dose,TCID50）及生长曲线等生物学指标对其生物学特性进行鉴定;将r LS/RSV-F滴鼻免疫BALB/c小鼠,于免疫后第49天经眼眶后静脉丛采血,分离血清,ELISA法检测IgG抗体效价,中和试验检测中和抗体效价。结果成功拯救表达RSV F蛋白的NDV重组病毒r LS/RSV-F,具有与亲本病毒相似的感染能力及生长动力学特性;r LS/RSV-F可刺激小鼠机体产生较高水平的针对RSV F蛋白的特异抗体及RSV中和抗体,与亲本病毒对照组相比,差异均有统计学意义（P ＜0. 05）。结论成功拯救了表达RSV F蛋白的NDV重组病毒,并通过动物实验证明重组病毒r LS/RSV-F具有较好的免疫原性,为RSV疫苗的研发提供了新思路。
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