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摘要：选择6只安装门静脉、肝静脉、股动脉、肠系膜静脉慢性血管瘘的健康泌乳中期西农萨能奶山羊作为试验动物，采用2×2交叉试验设计，每组3只，试验日粮由精饲料、粗饲料组成，比例分别为4 ∶6（高粗料组，HF）、6 ∶4（高精料组，HC）。结果表明，不同精粗比日粮条件下奶山羊门静脉、肝静脉、股动脉血浆中的葡萄糖浓度变化情况不同，其中HC组葡萄糖浓度的变化幅度略大，采食2 h达到最低值，4～6 h达到最大值； HR组变化较平缓，一般在采食后2 h达到最大值；HC组奶山羊门静脉、肝静脉、股动脉血浆中葡萄糖浓度均有所提高，但与HR组相比无显著差异。
关键词：日粮；精粗比；奶山羊；糖代谢
中图分类号： S827.5文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）02-0195-03
收稿日期：2014-10-10
基金项目：国家重点基础研究发展计划（编号：2011CB100802）。
作者简讯：姜发彬（1988—），男，福建沙县人，硕士研究生，主要从事反刍动物营养研究。E-mail：793750741@qq.com。
通信作者：庄苏，博士，副教授，主要从事反刍动物营养研究。E-mail：zhuangsu@njau.edu.cn。泌乳期是反刍动物重要的生理阶段，是1个高度耗能的过程，动物比平时需要更多的葡萄糖，只有少量葡萄糖是由小肠吸收而来，大多数葡萄糖来自肝脏的糖异生作用[1]。研究发现，动物所需的葡萄糖90%来自肝脏的糖异生作用[2]，最主要的生糖物质是瘤胃微生物发酵产生的丙酸，其余由甘油、氨基酸、乳酸转化而来。除了赖氨酸、亮氨酸外，几乎所有氨基酸都可生成葡萄糖[3]。门静脉排流组织（portal-drained viscera，PDV）是葡萄糖的主要代谢场所，其能量代谢占机体全身能量代谢的24%[4]，由消化道吸收的营养物质首先经PDV组织代谢，再由门静脉进入肝脏。泌乳期的反刍动物往往通过提高采食量或动用体内贮存来满足泌乳需要。随着机体采食量的提高，机体PDV组织大小、吸收能力也相应发生改变，肝脏糖异生也会随之加强。血浆中最重要的激素是胰岛素、胰高血糖素，其中胰高血糖素可刺激肝脏内磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因转录，促进肝脏糖原分解，保证糖的连续合成，胰岛素可明显抑制此过程[5]。此外，胰岛素还能有效提高氨基酸在乳腺中的摄取效率，提高乳蛋白含量[6]。生长激素、胰岛素样生长因子（IGF-1）对体内蛋白、脂质代谢有重要的调控作用，也影响葡萄糖合成与氧化。目前国内关于糖代谢营养调控的研究较多，有的已深入到代谢葡萄糖层次[7-8]，但有关PDV组织、肝脏对糖代谢规律的研究较少。本试验在不同精粗比日粮条件下，通过血管瘘技术、血流量测定技术，探讨PDV组织、肝脏中葡萄糖及相关激素的变化，旨在为研究泌乳期反刍动物的糖代谢规律提供参考。
1材料与方法
1.1试验动物及日粮组成
选择6只平均体质量为60～65 kg、平均日产奶量相近的处于泌乳中期的西农萨能奶山羊作为试验动物。试验前分别在奶山羊门静脉、肝静脉、股动脉、肠系膜静脉上安装永久性慢性多血管瘘[9-10]。手术后动物恢复期为2周，待动物恢复正常后进行试验。试验期内每天用300 IU/mL肝素钠溶液进行2次血管瘘护理，确保血管瘘通畅。试验动物平均每只每次提供0.9 kg干物质日粮，每日饲喂2次。试验日粮参照美国NRC奶山羊饲养标准并结合我国奶山羊饲养标准配制，日粮成分及营养水平见表1。
1.2试验设计与饲养管理
采用2×2交叉试验设计，随机分为2组，每组3只。每个试验期21 d，预试期18 d，采样期3 d。奶山羊单笼饲养，自由饮水。每天分别于08：00、18：00饲喂、挤奶各1次。
1.3样品采集及测定
1.3.1样品采集每个试验期的最后1 d用5 mL抗凝真空采血管于动物采食前及采食后2、4、6、8 h分别从门静脉、肝静脉、股动脉血管采集血液。将采集的血样置于冰盒中冷藏送回实验室，4 000 r/min 4 ℃下离心10 min制备血浆样，将血浆样置于-20 ℃冰箱中保存备用。
1.3.2指标测定所用试剂购自上海科华生物工程股份有限公司。血浆经试剂处理后用全自动生化分析仪（荷兰威图科学公司）测定葡萄糖浓度。采用Elisa试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定胰岛素与胰高血糖素浓度。采用放射免疫分析药盒（北京北方生物技术研究所）测定生长激素浓度。采用酶联免疫检测试剂盒（北京瑞格博科技发展有限公司）测定IGF-1浓度。葡萄糖流量：采样当天从肠系膜瘘管灌注对氨酸马尿酸用于测定门静脉、肝静脉、股动脉血流速度，并根据各血液中葡萄糖浓度计算其在肝脏及内脏组织的代谢情况。
1.4数据处理
采用SPSS 16.0软件分析数据，结果以“平均值±标准误”表示。
2结果与分析
2.1不同精粗比日粮条件下奶山羊血浆葡萄糖浓度的动态变化
由图1可见，动物采食后，HC日粮组门静脉、肝静脉、股动脉血浆中葡萄糖浓度均呈先降低再升高再降低的趋势，且均在采食后2 h达到最低值。HC日粮组门静脉、股动脉血浆葡萄糖在采食后4 h达到最大值，肝静脉约在采食后6 h达到最大值。HF日粮组血浆葡萄糖浓度变化较平稳，门静脉、肝静脉中葡萄糖浓度在采食后2 h达到最大或较大值，股动脉中在采食后4 h达到最大值。2种日粮条件下，门静脉、肝静脉血浆葡萄糖浓度的相关性分别为y=-471.38x3 3 394.9x2-8 142.4x 6 505.9，r2=0.833 4；y=-17.054x3 141.05x2-386.3x 353.27，r2=0.931 5。
2.2不同精粗比日粮对奶山羊血浆中葡萄糖浓度均值、流量均值的影响
关键词：日粮；精粗比；奶山羊；糖代谢
中图分类号： S827.5文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）02-0195-03
收稿日期：2014-10-10
基金项目：国家重点基础研究发展计划（编号：2011CB100802）。
作者简讯：姜发彬（1988—），男，福建沙县人，硕士研究生，主要从事反刍动物营养研究。E-mail：793750741@qq.com。
通信作者：庄苏，博士，副教授，主要从事反刍动物营养研究。E-mail：zhuangsu@njau.edu.cn。泌乳期是反刍动物重要的生理阶段，是1个高度耗能的过程，动物比平时需要更多的葡萄糖，只有少量葡萄糖是由小肠吸收而来，大多数葡萄糖来自肝脏的糖异生作用[1]。研究发现，动物所需的葡萄糖90%来自肝脏的糖异生作用[2]，最主要的生糖物质是瘤胃微生物发酵产生的丙酸，其余由甘油、氨基酸、乳酸转化而来。除了赖氨酸、亮氨酸外，几乎所有氨基酸都可生成葡萄糖[3]。门静脉排流组织（portal-drained viscera，PDV）是葡萄糖的主要代谢场所，其能量代谢占机体全身能量代谢的24%[4]，由消化道吸收的营养物质首先经PDV组织代谢，再由门静脉进入肝脏。泌乳期的反刍动物往往通过提高采食量或动用体内贮存来满足泌乳需要。随着机体采食量的提高，机体PDV组织大小、吸收能力也相应发生改变，肝脏糖异生也会随之加强。血浆中最重要的激素是胰岛素、胰高血糖素，其中胰高血糖素可刺激肝脏内磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因转录，促进肝脏糖原分解，保证糖的连续合成，胰岛素可明显抑制此过程[5]。此外，胰岛素还能有效提高氨基酸在乳腺中的摄取效率，提高乳蛋白含量[6]。生长激素、胰岛素样生长因子（IGF-1）对体内蛋白、脂质代谢有重要的调控作用，也影响葡萄糖合成与氧化。目前国内关于糖代谢营养调控的研究较多，有的已深入到代谢葡萄糖层次[7-8]，但有关PDV组织、肝脏对糖代谢规律的研究较少。本试验在不同精粗比日粮条件下，通过血管瘘技术、血流量测定技术，探讨PDV组织、肝脏中葡萄糖及相关激素的变化，旨在为研究泌乳期反刍动物的糖代谢规律提供参考。
1材料与方法
1.1试验动物及日粮组成
选择6只平均体质量为60～65 kg、平均日产奶量相近的处于泌乳中期的西农萨能奶山羊作为试验动物。试验前分别在奶山羊门静脉、肝静脉、股动脉、肠系膜静脉上安装永久性慢性多血管瘘[9-10]。手术后动物恢复期为2周，待动物恢复正常后进行试验。试验期内每天用300 IU/mL肝素钠溶液进行2次血管瘘护理，确保血管瘘通畅。试验动物平均每只每次提供0.9 kg干物质日粮，每日饲喂2次。试验日粮参照美国NRC奶山羊饲养标准并结合我国奶山羊饲养标准配制，日粮成分及营养水平见表1。
1.2试验设计与饲养管理
采用2×2交叉试验设计，随机分为2组，每组3只。每个试验期21 d，预试期18 d，采样期3 d。奶山羊单笼饲养，自由饮水。每天分别于08：00、18：00饲喂、挤奶各1次。
1.3样品采集及测定
1.3.1样品采集每个试验期的最后1 d用5 mL抗凝真空采血管于动物采食前及采食后2、4、6、8 h分别从门静脉、肝静脉、股动脉血管采集血液。将采集的血样置于冰盒中冷藏送回实验室，4 000 r/min 4 ℃下离心10 min制备血浆样，将血浆样置于-20 ℃冰箱中保存备用。
1.3.2指标测定所用试剂购自上海科华生物工程股份有限公司。血浆经试剂处理后用全自动生化分析仪（荷兰威图科学公司）测定葡萄糖浓度。采用Elisa试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定胰岛素与胰高血糖素浓度。采用放射免疫分析药盒（北京北方生物技术研究所）测定生长激素浓度。采用酶联免疫检测试剂盒（北京瑞格博科技发展有限公司）测定IGF-1浓度。葡萄糖流量：采样当天从肠系膜瘘管灌注对氨酸马尿酸用于测定门静脉、肝静脉、股动脉血流速度，并根据各血液中葡萄糖浓度计算其在肝脏及内脏组织的代谢情况。
1.4数据处理
采用SPSS 16.0软件分析数据，结果以“平均值±标准误”表示。
2结果与分析
2.1不同精粗比日粮条件下奶山羊血浆葡萄糖浓度的动态变化
由图1可见，动物采食后，HC日粮组门静脉、肝静脉、股动脉血浆中葡萄糖浓度均呈先降低再升高再降低的趋势，且均在采食后2 h达到最低值。HC日粮组门静脉、股动脉血浆葡萄糖在采食后4 h达到最大值，肝静脉约在采食后6 h达到最大值。HF日粮组血浆葡萄糖浓度变化较平稳，门静脉、肝静脉中葡萄糖浓度在采食后2 h达到最大或较大值，股动脉中在采食后4 h达到最大值。2种日粮条件下，门静脉、肝静脉血浆葡萄糖浓度的相关性分别为y=-471.38x3 3 394.9x2-8 142.4x 6 505.9，r2=0.833 4；y=-17.054x3 141.05x2-386.3x 353.27，r2=0.931 5。
2.2不同精粗比日粮对奶山羊血浆中葡萄糖浓度均值、流量均值的影响