猪瘟病毒糖基化E2蛋白在重组杆状病毒中的表达与鉴定

来源 :江苏农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hillyblue

【摘要】

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为获得糖基化的重组猪瘟病毒（CSFV）E2蛋白，通过PCR扩增出去除C端跨膜区的猪瘟兔化弱毒疫苗株（HCLV）E2蛋白基因，前面包含糖基化信号肽，末端引入StrepⅡ标签序列，将其克隆到Bac—to—Ba

【作者】

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李文良毛立张纹纹杨蕾蕾王小敏江杰元

【机构】

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江苏省农业科学院兽医研究所

【出处】

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江苏农业学报

【发表日期】

：

2013年2期

【关键词】

：

猪瘟病毒 E2蛋白糖基化杆状病毒表达系统 classical swine fever virus （CSFV） E2 protein glycosyl

【基金项目】

：

江苏省农业科技自主创新基金项目[DCX（10）4129]

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为获得糖基化的重组猪瘟病毒（CSFV）E2蛋白，通过PCR扩增出去除C端跨膜区的猪瘟兔化弱毒疫苗株（HCLV）E2蛋白基因，前面包含糖基化信号肽，末端引入StrepⅡ标签序列，将其克隆到Bac—to—Bac杆状病毒表达系统pFastBacTMHTB载体中，筛选获得阳性重组质粒pF-ge2，转化至含有杆状病毒穿梭载体的DHl0Bac感受态大肠杆菌中，经蓝白菌落筛选和PCR鉴定，获得重组表达载体rBac—ge2。在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒rAc-gE2。Western—bl

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