【摘 要】
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目的 探究微小RNA-539-5p(miR-539-5p)调控胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制.方法 采用实时定量PCR与Western印迹分别检测胃癌细胞系MGC-803、MKN-45、AGS与正常胃黏膜上皮细胞系GES-1中miR-539-5p、Xklp2靶蛋白(TPX2)mRNA及蛋白的表达.采用miR-539-5p mimics、si-TPX2及miR-539-5p、pcDNA-TPX2共转染胃癌MGC-803细胞.双荧光素酶报告基因实验验证miR-539-5p与TPX2的靶向关系.Wester
【机 构】
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郑州铁路职业技术学院药学院,河南 郑州 450000
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目的 探究微小RNA-539-5p(miR-539-5p)调控胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制.方法 采用实时定量PCR与Western印迹分别检测胃癌细胞系MGC-803、MKN-45、AGS与正常胃黏膜上皮细胞系GES-1中miR-539-5p、Xklp2靶蛋白(TPX2)mRNA及蛋白的表达.采用miR-539-5p mimics、si-TPX2及miR-539-5p、pcDNA-TPX2共转染胃癌MGC-803细胞.双荧光素酶报告基因实验验证miR-539-5p与TPX2的靶向关系.Western印迹检测细胞增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达.结果 miR-539-5p在胃癌细胞中比正常胃黏膜上皮细胞显著下调(P<0.05);体外过表达miR-539-5p可抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭,促进p21、p27表达,而抑制CyclinD1、MMP-2、MMP-9、MMP-14表达;TPX2是miR-539-5p的靶基因,且miR-539-5p可负向调控TPX2的表达;下调TPX2表达较si-NC组胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力明显受到抑制;与miR-539-5p+pcDNA组比较,上调TPX2表达可回复miR-539-5p过表达对MGC-803细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用.结论 miR-539-5p可通过下调TPX2表达而抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭,其可能作为未来胃癌治疗的潜在治疗靶点.
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