【摘 要】
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目的:弄清N-t-BOC-Leu-Ser-Thr-Arg-pNA作为激肽释放酶测定的发色底物的基础参数并建立血浆(前)激肽释放酶测定的程序。方法:以激肽释放酶及其他相关因子的制品及缺乏血浆测
【机 构】
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广东省深圳市第五人民医院检验科,云南省昆明医学院第二附属医院检验科,
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目的:弄清N-t-BOC-Leu-Ser-Thr-Arg-pNA作为激肽释放酶测定的发色底物的基础参数并建立血浆(前)激肽释放酶测定的程序。方法:以激肽释放酶及其他相关因子的制品及缺乏血浆测定其Km,max,Ki,回收率,对比试验,并确定最适测定条件。结果:该发色底物受激肽释放酶作用的Km和Vmax分别为235μmol/L和337 nmol(pNA).S-1.U-1(KK);该底物的酰基水解活性不依赖因子、、和蛋白C,而明显依赖于激肽释放酶,且对AT-和LBTI的抑制均不敏感。用该多肽建立了血浆激肽释放酶活性测定法,该方法与传统方法无论是活性测定或抗原定量均有很强的可比性,线性范围6.25%~300.0%。结论:B3644作为激肽释放酶测定的发色底物,具有良好的敏感性和选择性,是建立PK活性测定的理想发色底物。
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