论文部分内容阅读
目的：包装纯化具有感染性的腺相关病毒rAAV—hBMP7，检测其包装效率及感染滴度。方法：应用AAVHelper—FreeSystem、磷酸钙三质粒共沉淀法，将病毒质粒pAAVIRES—hrG—FP-hBMP，、辅助质粒pAAV—Helper和包装质粒pAAV—RC转染AAV-293细胞，进行病毒包装，荧光计数法测定病毒包装效率；反复冻融收获病毒液，按氯仿处理、PEG／NaCl沉淀的方法浓缩纯化；纯化的病毒液感染AAV—HT1080细胞观测荧光表达，原位8一半乳糖苷酶染色测定病毒感染效率和滴度。结果：转染